Comparación de adenosina deaminasa y detección de anticuerpos anti-antígeno A60 para el diagnóstico de meningitis tuberculosa / A comparative study for adenosine deaminase and anti-antigen A-60 antibodies detection for the diagnosis of tuberculous meningitis

Background: Diagnosis of tuberculous meningitis (TBM) is hampered by the lack of rapid and accurate diagnostic tools. We evaluated the immunological response to Mycobacterium tuberculosis anti-A60 antibodies in cerebrospinal fluid (CSF) in comparison to adenosine deaminase (ADA) determination, for the diagnosis of TBM. Methods: A total of 63 CSF samples were analyzed by indirect ELISA for the detection of anti- A60 IgG, IgM and IgA. These include samples from 17 patients with confirmed TBM and 46 control patients with other infections. Results: The mean individual anti-A60 IgM, IgG and IgA CSF antibody titers were significantly higher in TBM in comparison with control groups (p < 0.01). The best discriminatory CSF antibody for confirming TBM diagnosis was IgM, with an area under the receiver operating characteristic curve of 0.928 (95%CI 0.834-0.978), compared to 0.863 (95% CI: 0.752-0.936) for ADA testing (p = NS). The sensitivity of anti- A60 IgM CSF antibody titers (cutoff > 0.06 U/ml) was 94.1% compared to 88.2% for ADA (cutoff > 6.2 U/ml), p = NS. Both anti A60 IgM and ADA showed the same moderate specificity (80.4%). Two cases of TBM were correctly identified by anti-A60 IgM but missed by ADA. Conclusion: The ELISA test for anti-antigen A60 antibodies (IgM) is a rapid and sensitive tool for the rapid diagnosis of TBM that can be a complement to ALDA determination. The specificity of both tests is still a limitation in TBM diagnosis.

Antecedentes: El diagnóstico de meningitis tuberculosa (MTBC) se ve limitado por la ausencia de técnicas diagnósticas rápidas y precisas en líquido cefalorraquídeo (LCR). En este estudio evaluamos la respuesta inmunoló-gica de anticuerpos anti-antígeno A60 de Mycobacterium tuberculosis en LCR en comparación a la determinación de adenosina deaminasa (ADA). Métodos: Un total de 63 muestras de LCR fueron estudiadas mediante ELISA indirecto para detección de IgG, IgM e IgA anti-A60. Estas muestras incluyeron 17 casos de MTBC confirmada y 46 controles con otras infecciones. Resultados: Los títulos de IgG, IgM e IgA anti A-60 resultaron significativamente superiores en casos de MTBC versus controles (p > 0,01). El anticuerpo con mej or poder discriminatorio resultó IgM, con un área bajo la curva ROC de 0,928 (95%IC 0,8340,978), comparado a 0,863 (95% IC: 0,752-0,936) para ADA (p = NS). La sensibilidad de IgM anti-A60 (nivel de corte > 0,06 U/ml) fue de 94,1% versus 88,2% para ADA (nivel de corte > 6,2 U/ml), p = NS. Ambos IgM anti-A60 y ADA presentaron la misma especificidad baja-moderada (80,4%). Dos casos de MMTBC fueron correctamente identificados por IgM anti-A60 pero no por ALDA. Conclusión: La detección de anticuerpos anti-A60 (IgM) puede ser de ayuda en el diagnostico de MTBC en forma complementaria a la determinación de ALDA. La baja especificidad de ambos tests constituye su principal limitante.

Validação laboratorial de um método automatizado de dosagem da atividade de adenosina desaminase em líquido pleural e em líquido cefalorraquidiano / Laboratorial validation of an automated assay for the determination of adenosine deaminase activity in pleural fluid and cerebrospinal fluid

OBJETIVO: A incidência global de tuberculose reforça a necessidade de melhores ensaios para o diagnóstico desta doença, principalmente da tuberculose extrapulmonar. O objetivo do trabalho foi validar o desempenho de um método automatizado para a determinação da atividade de adenosina desaminase (ADA) no líquido pleural (LP) e no líquido cefalorraquidiano (LCR), comparando-o com um método convencional (Giusti modificado). MÉTODOS: Selecionaram-se 134 amostras da rotina laboratorial: 94 de LP e 40 de LCR. Foram realizadas as determinações da atividade de ADA através dos dois métodos. Calculou-se a precisão inter- e intra-ensaios, análise de regressão linear, testes de concordância simples e médias das diferenças. RESULTADOS: Os coeficientes de correlação para as amostras de LP e LCR foram, respectivamente, 0,96 e 0,95. A precisão interensaio foi determinada pela média de 21 amostras replicadas em ensaios diferentes para 3 níveis de atividade: baixa, média e alta. Os coeficientes de variação em porcentagem ( por centoCV) foram, respectivamente, 5,9, 8,1 e 5,8 para amostras de LP; e 21,9, 18,6 e 13,8 para amostras de LCR, respectivamente. A precisão intra-ensaio em por centoCV foi, respectivamente, 1,3 e 11,7 por cento para amostras de LP e LCR. A concordância entre os dois métodos em amostras de LP e LCR foi, respectivamente, 96,8 por cento e 100 por cento, considerando-se como valores de referência para o diagnóstico de TB 40 U/L (convencional) e 30 U/L (automatizado) em amostras de LP, e 9 U/L em amostras de LCR para os dois métodos. CONCLUSÕES: Os resultados validaram o método automatizado de determinação da atividade de ADA para o uso em amostras de LP e LCR como alternativa ao método convencional.

OBJECTIVE: The incidence of tuberculosis worldwide has emphasized the need for better assays designed to diagnose the disease, principally the extrapulmonary form. The objective of the present study was to validate the performance of an automated method for the determination of adenosine deaminase (ADA) activity in pleural fluid (PF) and cerebrospinal fluid (CSF), comparing it with a conventional method (the modified Giusti method). METHODS: In total, 134 samples were selected from among those tested in our laboratory: 94 PF samples and 40 CSF samples. The ADA activity was determined using the two methods. Inter- and intra-assay precision was determined, linear regression analysis was performed, simple concordance tests were conducted, and the means of the differences were calculated. RESULTS: The correlation coefficients for PF and CSF samples were, respectively, 0.96 and 0.95. Inter-assay precision was determined using 21 replicates at 3 different activity levels: low, medium and high. The percentage coefficient of variation ( percentCV) was, respectively, 5.9, 8.1 and 5.8 for PF samples, compared with 21.9, 18.6 and 13.8 for CSF samples. Intra-assay precision in percentCV was 1.3 and 11.7, respectively, for PF and CSF samples. The concordance between the methods in PF and CRF samples was, respectively, 96.8 percent and 100 percent, considering the reference values for the diagnosis of TB to be 40 U/L (conventional) and 30 U/L (automated) in PF samples, versus 9 U/L (for both methods) in CSF samples. CONCLUSIONS: The results validate the use of the automated method of determining ADA activity in PF and CSF samples as an alternative to the conventional method.

Utilidad de la determinación de adenosina deaminasa en líquido cefalorraquídeo para el diagnóstico de tuberculosis meníngea: experiencia de 4 años en un hospital de provincia / Usefulness of adenosine deaminase determination in cerebrospinal fluid for meningeal tuberculosis diagnosis: 4 years experience in a province hospital

The aim of this work was to study the usefulness of CSF adenosine deaminase determination in the diagnosis of tuberculous meningitis and determine if the proposed cutoff value of 7.1 IU/ml had the better sensitivitu and specificity. We retrospectively studied 148 patients, 12 with tuberculous meningitis and 136 with other central nervous system diseases. Adenosine deaminase values ranged from 3.6 to 31.2 IU/ml in patients with tuberculous meningitis and from 0.1 to 312 IU/ml in controls. The best sensitivity/specificity ratio (83.3 and 85.3 percent respectively) was obtained using a cutoff value of 6.5 IU/ml. It is concluded that CSF adenosine deaminase values are useful in the diagnosis of tuberculous meningitis and thet the cutoff value should be lowered to 6.5 IU/ml to improve its diagnostic yield

Adenosino-deaminase no líquido celalorraqueano de pacientes com a síndrome da imunodeficiência adquirida / Adenosine-deaminase in the cerebrospinal fluid of patients with acquired immunodeficiency syndrome

A determinaçao da atividade enzimática da adenosino-deaminase(ADA) no líquido cefalorraqueano (LCR) de pacientes com síndrome da imunodeficiência adquirida (AIDS) pode sinalizar, ainda que de modo inespecífico, a atividade de patologias associadas. Os níveis de atividade ADA, estudados no LCR de 263pacientes, estavam aumentados naqueles com patologias associadas em relaçao aos controles normais e em relaçao aos pacientes com AIDS que nao apresentam alteraçoes ao exame de LCR. No entanto, os níveis de ADA detectados no LCR nao apresentam diferença estatística ao se considerarem os seguintes grupos de pacientes distribuídos segundo os achados no próprio LCR: com anticorpos pa toxoplasmose, sífilis ou citomegalovírus; com C. neoformans ou seus antígenos; com bacilos álcool-ácido-resistentes; com linfomas.

Determinaçäo da atividade adenosina deaminásica, no líquido cefalorraquidiano, como importante ajuda no diagnóstico da meningite tuberculosa / Determination of adenosine deaminase activity in the cerebrospinal fluid, as an important diagnostic aid in the tuberculous meningitis

A meningite tuberculosa continua a desafiar os especialistas levando a sérios problemas de diagnóstico. Sua confirmaçao pode tornar-se particularmente difícil, principalmente em crianças, onde pequenas amostras de líquido cefalorraquidiano, por exemplo, sao submetidas aos diversos testes laboratoriais e à cultura. O diagnóstico definitivo é feito pela identificaçao do Mycobacterium tuberculosis, no líquido cefalorraquidiano, por coloraçao direta ou cultura. Devido à alta morbidade que caracteriza a doença e à efetiva especificidade terapêutica, nao raro os especialistas iniciam o tratamento em bases presuntivas, antes mesmo de receberem a confirmaçao laboratorial do diagnóstico, a qual pode demorar quase dois meses. Depreende-se, portento, a alta importância de um teste laboratorial que seja rápida, simples e sensível para o diagnóstico da meningite tubeculosa. Muitos pesquisadores têm demonstrado que a determinaçao da atividade da adenosina deaminase (ADA) no líquido cefalorraquidiano é de grande valor no diagnóstico da meningite tuberculosa inclusive porque ajuda na diferenciaçao com a meningite virótica linfocítica. O objetivo do presente trabalho foi demonstrar que a avaliaçao da atividade liquórica da ADA, determinada através do ADA-KIT, constitui uma importante ajuda no diagnóstico da meningite tuberculosa, por tratar-se de um método simples, sensível, de baixo custo e capaz de fornecer resultados em menos de duas horas.

Niveles séricos de adenosin deaminasa en el niño sano y en el que presenta neumopatía aguda no tuberculosa / Blood levels of adenosin deaminase in helathy child and in children with acute non tuberculose neumopathy

Con el propósito de investigar su utilidad en el diagnóstico de la TBC infantil se mide la adenosin deaminasa (ADA) sérica de 52 niños sanos, 23 pacientes con neumopatía aguda condensante, 47 contactos PPD + de TBC bacilíferos y 15 niños con TBC pulmonar demostrada bacteriológicamente. Los resultados (U/l) se expresan en medias ñ desviaciones estándar y son: sanos = 32.2 ñ 17,9; neumopatías agudas = 30,7 ñ 15,6; contactos TBC = 24,6 ñ 11,5; y TBC Koch = 41,8 ñ 18,8. Al comparar el grupo de los TBC con todos los otros grupos al 95 por ciento de sus intervalos de confianza se encuentra una sensibilidad de 53,5; especificidad de 66; valor predictivo de 22,4 y negativo de 5. Estos resultados son semejantes al comparar los otros grupos entre sí. La determinación de la adenosin deaminasa en el plasma de niños tuberculosos no ayuda a diferenciarlos de niños sanos, contactos TBC o neumopatías agudas